Tipaje HLA

Serología (Placas de tipaje HLA)

Productos para tipaje serológico de  antígenos HLA de Clase I y II por la técnica: microlinfotoxicidad. Los antisueros HLA específicos, reaccionan con los correspondientes antígenos en la membrana del linfocito

HLA Ready Plate ABC 144   (2 placas /72 pocillos)  Ref. 002 011 144

HLA Ready Plate AB 144      (2 placas /72 pocillos) Ref. 002 010 144

HLA Ready Plate ABC 120    (2 placas /60 pocillos)  Ref. 002 011 144

HLA Ready Plate AB 120       (2 placas /60 pocillos) Ref. 002 011 144

HLA Ready Plate ABC 72      (1 placa / 72 pocillos)  Ref. 002 011 144

HLA Ready Plate AB 72          (1 placa / 72 pocillos) Ref. 002 011 144

HLA Ready Plate DR 72         (1 placa / 72 pocillos)  Ref. 002 011 144

HLA Ready Plate B 27/ 1        (1 placa / 60 pocillos)  Ref. 002 011 144

HLA Ready Plate B 27/ 2        (1 placa / 60 pocillos)  Ref. 002 011 144

HLA Ready Plate B 27/ 5       (1 placa / 72 pocillos)   Ref. 002 011 144

SSP (alta resolución)

Tipaje de HLA clase I y HLA clase II mediante PCR con primers específicos(Sequence specific primers)

-          HLA Ready Gene Class I: tipaje HLA-A*, -B* and -C*-          HLA Ready Gene Class II: tipaje HLA-DRB1*, DRB3*, DRB4*, DRB5* and DQB1*-          Tipaje HLA Fluogene

 Fluogene es un método único para el tipaje molecular de grupos sanguíneos (RBC),antígenos plaquetarios (HPA) y HLA, que combina todas las ventajas de la SSP-PCR con la velocidad de la detección de fluorescencia a tiempo final emitida durante la amplificación. El análisis se basa en un sistema de sondas Taqman modificadas específicamente y detectadas por el Analizador FluoVista. No es necesario el análisis en gel de agarosa.

Los kits HLA Fluogene están diseñados para el tipaje de los alelos HLA Clase I (A, B, C) y II (DRB1, 3 4 y 5; y DQB1) de baja resolución, equiparable al tipaje serológico.

SSO

El kit LIFECODES HLA utiliza metodología SSO (resolución intermedia) para identificar qué alelos HLA Clase I y II de un locus específico están presentes en una muestra amplificada. Se basa en la hibridación con sondas SSO del ADN monocatenario marcado obtenido por PCR. Cada una de las distintas sondas puede ser homóloga de una secuencia del ADN amplificado exclusiva de un alelo o grupo de alelos. Las sondas se unen a microesferas Luminex ideadas para utilizarse con el Luminex Instrument. Se pueden mezclar hasta 100 poblaciones diferentes de microesferas Luminex al estar cada una de ellas marcada con un color de fluorescencia característico, y cada una lleva unida una sonda específica. ​

 Los kits de tipaje HLA de Lifecodes por SSO están disponibles para  HLA: A, B, C, DRB1, DQB1/DQA, DPB/DPA, DRB 3-4-5 y Null allele.

Para aumentar la resolución, también se han desarrollado los kits HLA eRes, disponibles para HLA- A, B, C y DRB1. En este caso, se necesitan dos pocillos por muestra para este análisis.

-Tipificación HLA de clase I y clase II: HLA-A, B, C, DRB1, DQB/DQA y DPB/DPA de resolución intermedia por SSO (Innotrain)

•Lifecodes HLA-A SSO eRES Typing Kit

•Lifecodes HLA-B SSO eRES Typing Kit

•Lifecodes HLA-C SSO eRES Typing Kit

•Lifecodes HLA-DRB1 SSO eRES Typing Kit

•Lifecodes HLA-DQB1/DQA SSO Typing Kit

•Lifecodes HLA-DPB1/DPA SSO Typing Kit

SBT

-Tipificación basada en secuenciación de HLA de alta resolución

-HLA SuBiTo – secuenciación

La técnica se basa en la secuenciación Sanger con nucleótidos marcados con cuatro colores. La estrategia de los sistemas SuBiTo consiste en separar tantas combinaciones de alelos heterocigotos como sea posible en el primer paso, mediante dos amplificaciones de PCR que se llevan a cabo en paralelo. En la secuenciación se hace un intento para lograr una resolución de 4 dígitos usando entre dos y seis reacciones de secuenciación.

En algunas combinaciones alélicas, el resultado puede mostrar ambigüedades. Para eliminarlas, Inno-Train ofrece unos kits con mezclas de secuenciación que permiten un Segundo Nivel de Secuenciación (ClassI-Seq2, DRB1-Seq2, DQB1-Seq2 y DPB1-Seq2).

-Protrans HLA Domino Stone – secuenciación

La secuención es la fuente de información más fiable sobre la secuencia de un gen, y por tanto es de gran interés para la caracterización de la gran diversidad alélica de los genes HLA humanos.

El sistema de secuenciación de Protrans está diseñado para alcanzar un nivel máximo de secuenciación grupo y alelo-específica con el menor número de ambigüedades, siendo flexible y permitiendo su adaptación a los requerimientos de cada laboratorio. Utilizando PROTRANS Domino Stones es posible mejorar la baja resolución de otras técnicas (SSP, SSO) obteniendo un resultado de alta resolución de 4 dígitos. Este kit separa el ADN con mezclas de primers específicos en dos haplotipos separados, asegurando el reconocimiento de los dos alelos en casi todos los casos. Permite una purificación y secuenciación sin pasar primero por gel de agarosa.

-(GenDx SBT excellerator)

SBT excellerator para identificación de alta resolución de los alelos HLA mediante mecanografia. Los kits HLA SBT excellerator, son juegos de cebador/oligonucleótidos, dedicados a la tipificación de alta resolución de HLA de Clase I y Clase II. La secuenciación de los exones 2, 3 y 4 del locus HLA, se puede realizar utilizando los cebadores de secuenciación de los kits de Base HLA SBTexcellerator, la secuenciación de los otros exones, solamente es necesario cuando hay ambigüedades.

-Secuenciacion Masiva 

NGSgo AmpX, HLA amplification for downstream sequencing applications